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标准偏差为0.052μg/mL
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简介则待测物C引入的相对标准不确定度:2)试样称量(m)产生的不确定度um)称取5.00g试样,所用天平的最大允许误差为±0.1mg,按照矩形分布计算,由称量试样引入的不确定度和相对不确定度 ...
则待测物C引入的高效相对标准不确定度:
(2)试样称量(m)产生的不确定度u(m)
称取5.00g试样,所用天平的液相最大允许误差为±0.1mg,按照矩形分布计算,色谱由称量试样引入的法测不确定度和相对不确定度分别为:
(3)待测液定容(V)产生的不确定度u(v)
样品经提取、净化、定鲜氮气吹干后用100-1000μL移液器移取1.00mL流动相溶解残留物,虾中则不确定度的高效计算如下:
①依据移液器校准证书,当k=2时,液相这种规格移液器的色谱扩展不确定度为,U(1000μL)=1.0μL,法测则其标准不确定度为:
②温度引入的定鲜不确定度,流动相的虾中膨胀系数为4.62×10-4/℃,实验室的高效温度为20±5℃,按照均匀分布,液相k=根号÷3,色谱则温度差异引入的不确定度为:
(4)重复性测定引入的不确定度u(X重)
对待测样重复测定6次,测定结果见表4,试样液中4-己基间苯二酚平均含量为5.054μg/mL,标准偏差为0.052μg/mL,则样品测定重复性带来的不确定度:
相对不确定度为:
(5)加标回收率引入的不确定度u(R)
称取六份空白基质(鲜虾)试样于中50mL离心管中,分别向6只离心管中加入50μg/mL的4-己基间苯二酚标准溶液100μL,根据DB33/3007-2015《食品中4-己基间苯二酚残留量的测定》的要求:从原始样品中取出代表性的样品500g,去头、去壳、去附肢,取可食部分。用组织捣碎机捣碎混匀,均分成两份分别装入到洁净容器中作为试样,密封并标识。将试样放入-18℃以下保存。称取59(精确到0.01g)样品置于50mL离心管中,加入10mL乙腈二氯甲烷溶液(体积比:7:3),高速组织捣碎机匀浆2min,盖塞,旋涡混匀lmin,超声提取10min,8500r/min离心5min,取上清液转入100mL旋转蒸发瓶中,重复上述操作一次。合并提取液于45℃旋发近干,取7.5mL二氯甲烷分三次超声溶解,合并,待净化。将上述待净化液转至固相萃取柱中。用6mL正己烷淋洗,将固相萃取小柱抽至近干,用6mL甲醇丙酮溶液(体积比:1:1)洗脱,收集洗脱液。洗脱液于50℃氮气吹干,残留物用1.0mL流动相溶解,过0.22μm的有机相为空滤膜,供液相色谱测定。6次平行试验测得加标回收率见表5。
加标回收率引入的标准不确定度:
加标回收率引入的相对不确定度:
3、合成不确定度
以上各不确定度分量相互独立,不考虑分量间的相关性,则鲜虾中4-己基间苯二酚测定结果合成不确定度为:
三、扩展不确定度及结果表示
扩展不确定度由合成不确定度乘以包含因子,试样中4-己基间苯二酚:
在95%置信水平下,k=2,U=k·ured(总)=0.094,试样中4-已基间苯二酚的含量X=(1.01±0.094)mg/kg。
四、结论
通过高效液相色谱法测定鲜虾中4-己基间苯二酚的含量,并对影响结果的不确定度各分量进行分析。通过分析发现影响结果不确定度的因素中由待测物浓度和回收率产生的影响较大,重复性测定次之,样品称量、待测液的定容引入的不确定度较小。因此在日常检测中,可以通过使用更精确的移液器来减小标准曲线配制过程中产生的不确定度;可以多次测量标准系列溶液各浓度点、以及依据样品浓度调整标准曲线各浓度的大小来减小标准曲线拟合产生的不确定度,从而减小由待测物浓度引入的不确定度。此外,可通过严格遵守实验方法,熟练实验步骤,控制固相萃取小柱质量等,减小由回收率带来的不确定度。
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相关链接:己基间苯二酚,二氯甲烷,固相萃取
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